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解析淋巴細(xì)胞分離液提取淋巴細(xì)胞的方法

更新時(shí)間:2014-03-31 點(diǎn)擊次數(shù):1902
淋巴細(xì)胞分離液是BI公司*開發(fā)的不含任何酵素、蛋白水解酶及動(dòng)物組分的一種試劑。運(yùn)用離子螯合技術(shù)使貼壁細(xì)胞溫和的脫落,zui大程度地保留完整的細(xì)胞表面蛋白及其生物功能,長(zhǎng)時(shí)間使用也無需擔(dān)心細(xì)胞受損。
淋巴細(xì)胞分離液可適用于血清及不含血清培養(yǎng)細(xì)胞,貼壁更緊密的細(xì)胞可選用木瓜蛋白酶或結(jié)晶胰酶。
淋巴細(xì)胞分離液細(xì)胞漂浮密度:1.077±0.001g/ml,成分:用泛影酸葡甲胺和右旋糖苷及氯化納等配制而成的滅菌水溶液,包裝體積:250ml,貯存:4-25℃避光保存,有效期1年,啟封后貯存于冰箱,使用范圍:適用于人淋巴細(xì)胞分離液。
淋巴細(xì)胞分離液提取淋巴細(xì)胞的方法:
1、采取外周靜脈血3ml
2、采用3ml N-S 或Hanks 液做對(duì)倍稀釋處理,即總體積為6ml
3、取一中試管,加入2ml的淋巴細(xì)胞分離液,然后將6ml稀釋過的血液小心加到分離液的上表面,剛開始加時(shí),動(dòng)作一定要慢要輕柔,后面可以加快速度,使分離液和血液zui終的比例為1:3,分離液界面保持清楚
4、離心,2000rpm ,20min,然后吸取PBMC
5、洗滌,將放有PBMC的離心管用N-S 充盈至10ml,混勻,2000rpm,10min,再洗滌兩次,并將轉(zhuǎn)速降為1000rpm,10min,即可得到PBMC
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